随着我国2015版《化妆品安全技术规范》的出台和实施，与2007版《化妆品卫生规范》相比，就微生物检验方法做出了一些修改。通过Intertek HBP健康与美容产品部全体专业审核员多年来的化妆品工厂GMP审核经验及其专业知识，精炼出化妆品实验室微生物检测的注意事项。

主要内容分为两大项：实验室布局和常见问题的问答。

一.   实验室布局

关于化妆品微生物实验室建筑技术的要求，可以参考GB 50346-2011《生物安全实验室建筑技术规范》，其中对生物安全实验室的分级、分类和技术指标做出了很明确的阐述。

二.   常见问题的问答

①.  问：不同培养基的灭菌条件不一致，是否可以合并成一个灭菌条件？

答：根据2015版《化妆品安全技术规范》，培养微生物的培养基灭菌条件有三种，如下表1，如果没有遵从如下灭菌条件，可能会导致最后的培养结果有偏离。

表1  每种微生物培养所需的培养基

②. 问：在实际工作中，由于一些原因导致微生物培养时间与标准规定培养时间不一致，培养结果是否可以接受？

答：同样依据表1，如果培养时间与标准规定培养时间不一致，如实际培养时间多余或少于标准规定的时间范围都会影响试验结果。因为一般的微生物在一个相对稳定的环境中的生长曲线是“S”形，培养时间多一些或少一些可能会对试验结果有重大影响，别人也无法重复试验结果。

③.   问：微生物培养箱能否放置在接种室？

答：不能。会有交叉污染的风险，此外如果接种室是利用臭氧来消毒的话，臭氧会影响培养箱里面正在培养的微生物。

④.   问：霉菌培养箱、细菌培养箱能否放置在同一个房间培养？

答：可以。有条件的话可以分不同的房间。

⑤.   问：霉菌和细菌是否可以用同一个培养箱培养？（分时段单独培养）

答：不可以。通过表2就可知，虽然霉菌培养箱和生化培养箱具备培养细菌、霉菌、酵母菌的能力，但是一般的微生物检测是细菌、霉菌和酵母同时进行，如果用同一个培养箱分时段单独培养很难证明试验结果的有效性；同时，企业的生产一般是连续的，导致微生物检验也是连续的，一个培养箱也满足不了实际质控的要求。

表2 三种培养箱的对比

⑥.   问：如何对培养箱进行消毒？

答：培养箱需要定期消毒。一般的消毒剂为75%的酒精；由于培养箱内胆材料一般为不锈钢，所以不适合用次氯酸钠或苯扎溴铵，因为这些消毒剂对不锈钢有腐蚀性。

⑦.   问：对于外购的培养基，开瓶之后的可以保存多久？

答：对于外购的培养基，开瓶之后的有效期需要经过验证才能确定，一般情况下开瓶之后一年内都可以使用。

⑧.   问：灭菌后的培养基的可以保存多久？

答：灭菌后的培养基的有效期同样也需要验证，一般经验为冰箱4℃可以保持3个月，室温1个月。用来封口的塞子最好是规格统一的，不然验证就没有意义。

⑨.   问：可以使用微波炉来溶解培养基吗？

答：灭菌后的培养基室温放置一段时间后会凝固，使用前需要溶解，通常采用水浴的方式。使用微波炉也可以，不过需要验证。

⑩.   问：培养箱中培养的培养皿是正着放置还是倒着？

答：培养箱中培养的培养皿需倒扣，第一有利于微生物向上吸收营养物质，第二避免培养皿盖上的冷凝水污染微生物。

?.  问：什么时候需要做空白对照和阳性对照？

答：微生物试验都要求做空白对照；但是不同的参考标准对阳性对照规定不一样，中国药典规定需要做阳性对照，美国药典、欧洲药典和日本药典没有强制规定。

?.   问：一般的微生物检验室需要生物安全柜吗？

答：不一定。微生物检验室的分类及所需的主要设备，如表3。

表3微生物检验室的分类及所需的主要设备

?.   问：该怎么选择合适的生物安全柜？

答：对于实验室生物安全柜的安装及使用，在GB 50346-2011《生物安全实验室建筑技术规范》中有很详细的说明，表4为生物安全实验室选用生物安全柜的原则。为了更多的了解生物安全柜的知识，可以阅读JG 170-2005《生物安全柜》和YY 0569-2011《II级生物安全柜》等资料。

表4生物安全实验室选用生物安全柜的原则